Δομή, Παθογένεση και Διάγνωση – Μικροβιακή Διαδικτυακή

0
Δομή, Παθογένεση και Διάγνωση – Μικροβιακή Διαδικτυακή

Ο ιός της ηπατίτιδας C, ένας ιός RNA, ανήκει στο γένος hepacivirus της οικογένειας Flaviviridae. Είναι η πιο σημαντική αιτία παρεντερικής μη-Α, μη-Β ηπατίτιδας (NANBH). Οι περισσότεροι ασθενείς με λοίμωξη από ηπατίτιδα C αναπτύσσουν χρόνιες ηπατικές παθήσεις, εξελισσόμενες σε ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα και κίρρωση.

Σύμφωνα με την ICTV (διεθνής επιτροπή για την ταξινόμηση των ιών), η ηπατίτιδα C έχει οκτώ γονότυπους και 93 υποτύπους.

Δομή της ηπατίτιδας C

Η ηπατίτιδα C ανήκει στο γένος hepacivirus της οικογένειας Flaviviridae. Έχει μεγάλη ομοιότητα με τον ιό της ηπατίτιδας D, τον ιό του κίτρινου πυρετού και τον ιό του δάγκειου πυρετού. Η γενική δομή του ιού της ηπατίτιδας C έχει τα ακόλουθα χαρακτηριστικά:

  • Είναι ένας σφαιρικός ιός με περίβλημα με διάμετρο 55 nm (περίπου).
  • Θετική έννοια, το μονόκλωνο RNA των 9,6 kb είναι το γενετικό υλικό του ιού.
  • Το γονιδιωματικό υλικό κωδικοποιεί δέκα δομικές και ρυθμιστικές πρωτεΐνες.
  • Οι δομικές πρωτεΐνες περιλαμβάνουν μια πρωτεΐνη πυρήνα και δύο πρωτεΐνες περιβλήματος (Ε1 και Ε2).
  • Οι δύο πρωτεΐνες του περιβλήματος υφίστανται παραλλαγή λόγω των υπερμεταβλητών περιοχών μέσα στο γονίδιο.

Γονιδιωματική διάταξη του ιού της ηπατίτιδας C

  • Το HCV έχει μονόκλωνο RNA συν-κλώνου 9,6 kb.
  • Το γονιδίωμα έχει ένα μακρύ ανοιχτό πλαίσιο ανάγνωσης (ORF) που κωδικοποιεί πρόδρομες ουσίες πολυπρωτεϊνών. Η πρωτεΐνη έχει 3010 αμινοξέα.
  • Ο HCV έχει μια μή μεταφρασμένη περιοχή 5′ μήκους 341 νουκλεοτιδίων (UTR) που βρίσκεται ανάντη του ORF στο RNA. Το 5′ UTR αποτελείται από 4 εξαιρετικά δομημένα πεδία, I έως IV.
  • Οι τομείς II, III και IV του 5′ UTR με τα πρώτα 12 έως 30 νουκλεοτίδια της περιοχής κωδικοποίησης του πυρήνα αποτελούν το IRES (εσωτερική θέση εισόδου ριβοσώματος).
  • Το IRES μπορεί να συνδεθεί απευθείας στο ριβόσωμα και να ξεκινήσει τη διαδικασία μετάφρασης.
  • Ο ιός παράγει πολυπρωτεΐνη μετά τη διακοπή της μετάφρασης κατά τη διάρκεια και μετά τη μετάφραση. Έτσι σχηματίζονται δέκα πρωτεΐνες. πρωτεΐνες πυρήνα, πρωτεΐνες φακέλου (Ε1 και Ε2) και μη δομικές πρωτεΐνες (NS1 ή p7, NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A και NS5B).
Γονιδιωματική δομή του HCV

Αντιγραφή του ιού της ηπατίτιδας C

Η αντιγραφή του ιού της ηπατίτιδας C λαμβάνει χώρα στα ηπατοκύτταρα και μερικές φορές η αναπαραγωγή μπορεί να συμβεί σε μονοκύτταρα, δενδριτικά κύτταρα και Β και Τ λεμφοκύτταρα. Τα βήματα που περιλαμβάνονται στην αναπαραγωγή είναι τα εξής:

Αντιγραφή του HCV

Συνημμένο

Ενώ κυκλοφορούν στην κυκλοφορία του αίματος, τα σωματίδια του ιού συνδέονται με τη λιποπρωτεΐνη. Το ιικό κύτταρο που περιβάλλεται από λιποπρωτεΐνη προσκολλάται σε διάφορους κυτταρικούς υποδοχείς όπως CD81, SR-B1, LDL-R, EGFR και EphA2.

Είσοδος

Μετά την προσκόλληση, η είσοδος του ιικού σωματιδίου διευκολύνεται από την ενδοκυττάρωση που προκαλείται από κλαθρίνη.

Αποκάλυψη

Μετά τη σύντηξη με την κυτταρική μεμβράνη, το καψίδιο του ιού διασπάται από τον μηχανισμό που ενεργοποιείται από το χαμηλό pH του ενδοσώματος. Η αποκάλυψη του καψιδίου απελευθερώνει το γονιδίωμα του ιού στο κυτταρόπλασμα του κυττάρου ξενιστή.

Μετάφραση

Το RNA μεταφράζει έναν πρόδρομο πολυπρωτεΐνης, που διασπάται σε γωνιακή πρωτεΐνη από το ένζυμο πρωτεάσες. Η μετάφραση γίνεται σε RER (ακατέργαστο ενδοπλασματικό δίκτυο).

Αντιγραφή

Ένα σύμπλεγμα αντιγραφής σχηματίζεται από μη δομικές πρωτεΐνες και πρωτεΐνες-ξενιστές, οι οποίες συνθέτουν πολλαπλά αντίγραφα του γονιδιώματος HCV RNA με τη βοήθεια ενός RNA μείον κλώνου ως εκμαγείο.

Ωρίμανση και Συναρμολόγηση

Ο ιός αποκτά γλυκοπρωτεΐνη Ε1 και Ε2 από το ER του κυττάρου ξενιστή (ενδοπλασματικό δίκτυο). Η συναρμολόγηση γίνεται και στο ER. Το λιποϊικό σωματίδιο σχηματίζεται αμέσως μετά την ωρίμανση και λίγο πριν την απελευθέρωση.

Ελευθέρωση

Η απελευθέρωση των ιικών σωματιδίων λαμβάνει χώρα με εξωκυττάρωση. Ωστόσο, η μετάδοση σε άλλα κύτταρα πραγματοποιείται μέσω ενός μηχανισμού χωρίς κύτταρα.

Παθογένεση της ηπατίτιδας C

Ο HCV μεταφέρεται στην κυκλοφορία του αίματος του μολυσμένου ατόμου. Παρόλο που τα φυσικά κύτταρα-στόχοι του είναι ηπατοκύτταρα, μπορούν επίσης να στοχεύσουν τα Β λεμφοκύτταρα. Το 50% των ηπατοκυττάρων μπορεί να μολυνθεί κατά τη διάρκεια της χρόνιας ηπατίτιδας. Σχεδόν όλοι οι μολυσμένοι άνθρωποι αναπτύσσουν επίμονη ιαιμία, η οποία σχετίζεται με διαφορετικό βαθμό φλεγμονής και ίνωσης. Τυπικές ιστοπαθολογικές λεπτομέρειες στη χρόνια ηπατίτιδα είναι η πυλαία φλεγμονή, η μεσοφασική ηπατίτιδα και η λοβιακή νέκρωση.

Μολυσματικός παράγοντας

Η ηπατίτιδα C έχει διαφορετικούς παράγοντες που βοηθούν τον ιό να μολύνει τα ανθρώπινα ηπατοκύτταρα και να αναπτύξει επιμονή. Είναι οι εξής:

  • Η γλυκοπρωτεΐνη Ε2 ξεκινά την προσκόλληση του ιού.
  • Η γλυκοπρωτεΐνη Ε1 πιστεύεται ότι παίζει ρόλο στη σύντηξη της μεμβράνης του ενδοκυτταροπλασματικού ιού.
  • Είναι δύσκολο να παραχθούν εμβόλια κατά του HCV λόγω των πολύ διαφορετικών αλλά στενά συνδεδεμένων γονιδιωματικών δομών του σε ένα μολυσμένο άτομο.
  • Η μη δομική πρωτεΐνη NS5A που παράγεται από το γονιδίωμα του HCV είναι ανθεκτική στην ιντερφερόνη, επομένως η ιντερφερόνη δεν μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τη θεραπεία της λοίμωξης από ηπατίτιδα C.

Μετάδοση της ηπατίτιδας C

Η λοίμωξη από ηπατίτιδα C εμφανίζεται μόνο στους ανθρώπους. Η μετάδοση γίνεται από ένα μολυσμένο άτομο σε ένα υγιές άτομο με τους ακόλουθους τρόπους:

Παρεντερική μετάδοση

Η παρεντερική μετάδοση των λοιμώξεων από HCV συμβαίνει με τους ακόλουθους τρόπους:

  • Μετάγγιση αίματος είναι ο πιο συχνός λόγος για την ενημέρωση της λοίμωξης από ηπατίτιδα C. Εμφανίζεται σε μία περίπτωση ανά 100.000 μονάδες αίματος που μεταγγίζεται.
  • Κοινή χρήση βελόνας σε χρήστες ενδοφλέβιων ναρκωτικών. Είναι ο κύριος λόγος για παρεντερική μετάδοση.
  • Μεταμόσχευση οργάνων

Σεξουαλική μετάδοση

Το 20% των περιπτώσεων λοίμωξης από HCV θεωρείται ότι μεταδίδεται σεξουαλικά. Διασταυρούμενη μόλυνση με HIV παρατηρείται στις περισσότερες περιπτώσεις.

Περίοδος επώασης

Η περίοδος επώασης του HCV κυμαίνεται από 2 εβδομάδες έως 6 μήνες. Η μέση περίοδος είναι περίπου οκτώ εβδομάδες.

Συμπτώματα

Ο HCV είναι ο αιτιολογικός παράγοντας της οξείας καθώς και της χρόνιας λοίμωξης από HCV. Αυτό οδηγεί σε επιπλοκές που προκαλούνται από ηπατίτιδα. Τα συμπτώματα της λοίμωξης από ηπατίτιδα C είναι τα εξής:

Οξεία HCV λοίμωξη

Οι περισσότεροι ασθενείς με οξεία λοίμωξη είναι ασυμπτωματικοί και δεν εξελίσσονται σε ίκτερο. Τα συμπτώματα σε αυτούς τους συμπτωματικούς ασθενείς είναι ήπια. Τα συμπτώματα είναι τα εξής:

  • Πυρετός
  • Κούραση
  • Μειωμένη όρεξη
  • Ναυτία
  • Εμετός
  • Κοιλιακό άλγος
  • Σκούρα ούρα
  • Πόνος στις αρθρώσεις
  • Λιγότερο από το 25% των συμπτωματικών ασθενών αναπτύσσουν ίκτερο.

Χρόνια HCV λοίμωξη

Οι περισσότερες χρόνιες περιπτώσεις είναι ασυμπτωματικές αλλά μπορεί να παρουσιάσουν μη ειδικά συμπτώματα όπως κόπωση ή κακουχία.

Περαιτέρω επιπλοκές

Η κίρρωση και το ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα είναι οι περαιτέρω επιπλοκές των λοιμώξεων από HCV.

Χρειάζονται έως και 20 χρόνια για να εξελιχθούν οι λοιμώξεις κίρρωση. Η εξέλιξη εμφανίζεται στο 20% περίπου των περιπτώσεων. Οι ασθενείς με κίρρωση κινδυνεύουν να αναπτύξουν δευτερογενή ηπατική ανεπάρκεια, πυλαία υπέρταση και άλλες επιπλοκές.

Το ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα είναι μια άλλη επιπλοκή του HCV. Προχωρά μετά από περίπου 30 χρόνια χρόνιας λοίμωξης HCV και κίρρωσης. Εμφανίζεται στο 1-5% των ατόμων με κίρρωση.

Διάγνωση Λοίμωξης Ηπατίτιδας C

Συλλογή και μεταφορά δειγμάτων

Ο ορός αίματος είναι το δείγμα επιλογής. Συλλέξτε 15 ml αίματος σε ένα φιαλίδιο χωρίς το αντιπηκτικό. Μεταφέρετε το δείγμα το συντομότερο δυνατό. Μόλις λάβετε το δείγμα, αφήστε το να πήξει και φυγοκεντρήστε το. Έχει ως αποτέλεσμα τον διαχωρισμό του ορού από το αίμα.

Σε περίπτωση καθυστέρησης στη μεταφορά του δείγματος, βάλτε το στο ψυγείο στους 4℃.

Επεξεργασία δειγμάτων

Υπάρχουν πολλοί τρόποι επεξεργασίας δειγμάτων ορού. Η συμβατική μέθοδος εργαστηριακής διάγνωσης ασθενειών είναι η παρατήρηση των ιών με ηλεκτρονική μικροσκοπία και η καλλιέργεια ιών. Ωστόσο, η καλλιέργεια και η ηλεκτρονική μικροσκοπική παρατήρηση είναι κατάλληλες μόνο για ερευνητικούς σκοπούς.

Έτσι, ο πιο βολικός τρόπος για τη διάγνωση της λοίμωξης από HCV είναι η ανίχνευση αντιγόνου, αντισωμάτων και νουκλεϊκού οξέος.

Ανίχνευση Αντιγόνου

Η ανίχνευση του αντιγόνου πυρήνα του HCV γίνεται με τη χρήση ELISA (ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία) και CLIA (ανοσοδοκιμασία χημειοφωταύγειας).

Ανίχνευση αντισωμάτων

Αντισώματα κατά των πρωτεϊνών πυρήνα, φακέλου, NS3 και NS4 εμφανίζονται σε οξεία μόλυνση μόνο μετά από 6-8 εβδομάδες αρχικής μόλυνσης και επιμένουν σε όλη τη ζωή. Το κιτ RDT (κιτ δοκιμής ταχείας ανίχνευσης), ELISA και EIA χρησιμοποιούνται για την ανίχνευση αντισωμάτων. Αλλά η ανασυνδυασμένη ανάλυση ανοσοστύπωσης που χρησιμοποιεί ανασυνδυασμένο αντιγόνο HCV είναι η πιο ειδική δοκιμή για ανίχνευση.

Ανίχνευση Νουκλεϊκού Οξέος/ Μοριακή Διάγνωση

Η PCR (αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης) ανιχνεύει το νουκλεϊκό οξύ (RNA) του HCV από το δείγμα ορού. Είναι η πιο ειδική εξέταση για τη διάγνωση της οξείας λοίμωξης από HCV, επειδή ανιχνεύει την παρουσία του ιού, διορθώνει ψευδώς θετικά κρούσματα και προσδιορίζει τον γονότυπο.

Άλλες Δοκιμές

Πριν ξεκινήσετε την αντιική θεραπεία, συνιστάται η διεξαγωγή βιοψίας ήπατος. Ωστόσο, δεν ισχύει για εργαστηριακή διάγνωση.

Θεραπεία, Πρόληψη και Έλεγχος της λοίμωξης από ηπατίτιδα C

Αντιμετώπιση των συμπτωμάτων είναι η μόνη θεραπεία που απαιτείται κατά τη διάρκεια της οξείας λοίμωξης. Όμως οι χρόνιες περιπτώσεις απαιτούν θεραπεία με PEGυλιωμένη ιντερφερόνη και τον αντιικό παράγοντα ριμπαβιρίνη.

Εμβόλια δεν είναι διαθέσιμα. Επίσης, η ανοσοσφαιρίνη δεν βοηθά στην πρόληψη της μετάδοσης. Έλεγχος και πρόληψη η μετάγγιση αίματος, η μεταμόσχευση οργάνων ή η σεξουαλική επαφή με άτομα που είναι θετικά στον HCV είναι ο μόνος τρόπος πρόληψη και έλεγχος η μόλυνση.

Η PEGυλιωμένη ιντερφερόνη (ομοιοπολική σύζευξη ανασυνδυασμένης ιντερφερόνης-άλφα και πολυαιθυλενογλυκόλης) χρησιμοποιείται για τη θεραπεία χρόνιων περιπτώσεων επειδή ο HCV μπορεί να αναπτύξει αντοχή στην ιντερφερόνη.

βιβλιογραφικές αναφορές

  • Bajpai, M., Gupta, E., & Choudhary, A. (2014). Ιός ηπατίτιδας C: Έλεγχος, διάγνωση και ερμηνεία εργαστηριακών δοκιμασιών. Asian Journal Of Transfusion Science, 8(1), 19. https://doi.org/10.4103/0973-6247.126683
  • Ηπατίτιδα Γ. ΠΟΥ. ενθ. (2022). Ανακτήθηκε στις 19 Μαΐου 2022, από https://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/hepatitis-c.
  • ICTV. Talk.ictvonline.org. (2022). Ανακτήθηκε στις 20 Μαΐου 2022, από https://talk.ictvonline.org/ictv_wikis/flaviviridae/w/sg_flavi/634/table-1—confirmed-hcv-genotypes-subtypes-march-2022.
  • Chevaliez S, Pawlotsky JM. Γονιδίωμα HCV και Κύκλος Ζωής. Στο: Tan SL, συντάκτης. Ιοί Ηπατίτιδας C: Γονιδιώματα και Μοριακή Βιολογία. Norfolk (Ηνωμένο Βασίλειο): Horizon Bioscience; 2006. Κεφάλαιο 1. Διαθέσιμο από: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK1630/
  • Dustin, LB, Bartolini, B., Capobianchi, MR, & Pistello, M. (2016). Ιός ηπατίτιδας C: κύκλος ζωής στα κύτταρα, λοίμωξη και απόκριση ξενιστή και ανάλυση μοριακών δεικτών που επηρεάζουν το αποτέλεσμα της μόλυνσης και την απόκριση στη θεραπεία. Κλινική μικροβιολογία και λοίμωξη: η επίσημη δημοσίευση της Ευρωπαϊκής Εταιρείας Κλινικής Μικροβιολογίας και Λοιμωδών Νοσημάτων, 22(10), 826–832. https://doi.org/10.1016/j.cmi.2016.08.025
  • Parija, S. (2012). Εγχειρίδιο Μικροβιολογίας και Ανοσολογίας (2η έκδ.,) Σελίδα 555-557.Elsevier, τμήμα της Reed Elsevier India Private Limited.

Schreibe einen Kommentar